Сврха и кораци укључени у тест кариотипа
Ако је ваш лекар препоручио тест кариотипа за вас или ваше дијете, или након амниоцентезе, шта значи овај тест? Који услови могу да дијагностикују кариотип, који су кораци укључени у вршење тестова и која су њихова ограничења?
Шта је тест кариотипа?
Кариотип је фотографија хромозома у ћелији . Кариотипи се могу узимати из крвних зрнаца, ћелија коже плода (од амниотске течности или плаценте) или ћелија коштане сржи.
Који услови могу бити дијагностиковани тестом кариотипа?
Кариотипови се могу користити за преглед и потврђивање хромозомских абнормалности као што је Довнов синдром, и постоји неколико различитих врста абнормалности које се могу открити.
Једно од њих су тризомије у којима постоје три копије једног од хромозома, а не два. Насупрот томе, моносомије се јављају када је присутна само једна копија (умјесто две). Поред трисомија и монозомија постоје делеције хромозома у којима недостаје део хромозома и транслокације хромозома, у којима је део једног хромозома повезан са другим хромозомом (и обрнуто у балансираним транслокацијама).
Примери трисомија укључују:
- Довнов синдром (трисомија 21)
- Едвардов синдром ( трисомија 18 )
- Патауов синдром (трисомија 13)
- Клинефелтеров синдром (КСКСИ и друге варијације) - Клинефелтер-ов синдром се јавља код 1 од 500 новорођенчади и изгледа да се повећава у инциденцији
- Тројни Кс синдром (КСКСКС)
Пример монозомије укључује:
- Турнеров синдром (Кс0) или моносомија Кс - Око отприлике 15 процената спаваца услед је Турнеровог синдрома, али ова трисомија је присутна само у око 1 у 2000 живорођенчади
Примери хромозомских брисања укључују:
- Цри-ду-Цхат синдром (недостаје хромозом 5)
- Виллиамсов синдром (недостаје хромозом 7)
Транслоцатионс - Постоје многи примери транслокација укључујући транслокацију Довнов синдром. Робертсоновске транслокације су прилично честе, које се јављају код отприлике 1 од 1000 људи.
Мозаикизам је стање у којем неке ћелије у телу имају хромозомске абнормалности, док друге не. На пример, мозаик Довнов синдром или мозаична трисомија 9. Потпуно трисомија 9 није компатибилна са животом, али мозаична трисомија 9 може довести до живог рођења.
(Пример вреди хиљаду речи. Сазнајте о разликама између транслокације, трисомије и мозаика Довновог синдрома .)
Када је направљен кариотип?
Постоји много ситуација у којима кариотип може бити препоручен од стране вашег лекара. То може укључивати:
- Деца или деца која имају здравствена стања која указују на хромозомске абнормалности које још нису дијагностиковане.
- Одрасли који имају симптоме који указују на хромозомске абнормалности (на пример, мушкарци са Клинефелтеровом болестом могу ићи без дијагнозе до пубертета или одрасле доби.) Неки од поремећаја трисомије мозаика такође могу ићи без дијагнозе.
- Неплодност - генотипски кариотип може бити учињен за неплодност. Као што је горе наведено, неке хромозомске абнормалности могу ићи без дијагностификовања све до одрасле доби. Жена са Турнерсовим синдромом или човеком са једним од варијанти Клинефелтера можда неће бити свјесна стања док се не боре са неплодношћу.
- Пренатално тестирање - У неким случајевима, као што је транслокација Довнов синдром, стање може бити наследно, а родитељи могу бити тестирани ако је дете рођено са Довновим синдромом. (Важно је напоменути да је већина времена Довнов синдром није наследни поремећај, већ случајна мутација.)
- Мртворођивање - Кариотип се често врши као део тестирања након мртворођене деце.
- Понављајуће побачаји - родитељски кариотип понављајућих побачаја може дати закључке о разузданим губицима који се понављају. Сматра се да су хромозомске абнормалности, као што је трисомија 16, узрок најмање 50 посто сплава.
- Леукемија - Тестирање кариотипа се такође може урадити како би се помогло у дијагностификацији леукемија, на примјер, тражећи Пхиладелпхиа хромозом који се налази код неких људи са хроничном мијелогозном леукемијом или акутном лимфоцитном леукемијом.
Кораци укључени у тест кариотипа
Тест кариотипа може да звучи као једноставан тест крви, због чега се многи питају зашто је потребно толико времена да би добили резултате. Овај тест је прилично сложен након сакупљања. Хајде да погледамо ове кораке како бисте разумели шта се дешава у току чекања на тест.
1. Сампле Цоллецтион
Први корак у извођењу кариотипа је сакупљање узорка. Код новорођенчади се прикупља узорак крви који садржи црвене крвне ћелије, беле крвне ћелије, серум и друге течности. Кариотип ће бити урадјен на белим крвним ћелијама које се активно деле (стање познато као митоза). Током трудноће, узорак може бити или амнионска течност прикупљена током амниоцентезе или комада постељице прикупљене током теста узимања узорака цхориониц вилли (ЦВС). Амниотска течност садржи феталне ћелије коже које се користе за стварање кариотипа.
2. Превоз до лабораторије
Кариотипи се изводе у одређеној лабораторији која се зове цитогенетска лабораторија - лабораторија која испитује хромозоме. Нису све болнице имале цитогенетске лабораторије. Ако ваша болница или медицинска установа нема своју лабораторију за цитогенетику, тестни узорак ће бити послат у лабораторију која је специјализована за анализу кариотипа. Тестни узорак анализирају специјално обучени цитогенетски технолози, докторат. цитогенетичари или медицински генетичари.
3. Раздвајање ћелија
У циљу анализе хромозома, узорак мора садржавати ћелије које се активно деле. У крви, беле крвне ћелије активно делити. Већина феталних ћелија активно делити. Када узорак достигне цитогенетичку лабораторију, не-подељене ћелије се одвајају од ћелија за поделу помоћу посебних хемикалија.
4. Гровинг Целлс
Како би имали довољно ћелија за анализом, ћелије за поделу се гајују у посебним медијима или ћелијској култури. Овај медиј садржи хемикалије и хормоне који омогућавају ћелијама да се поделе и умножавају. Овај процес култивације може трајати три до четири дана за крвне ћелије, а до недељу дана за феталне ћелије.
5. Синхронизовање ћелија
Хромозоми су дугачак низ људске ДНК. Да би се видјели хромозоми под микроскопом, хромозоми морају бити у најкомпактнијој форми у фази ћелијске подјеле (митозе) познате као метафаза. Да би се све ћелије довеле у ову специфичну фазу дељења ћелија, ћелије се третирају хемикалијом која зауставља дељење ћелија на месту где су хромозоми најкомпактнији.
6. Отпуштање хромозома из њихових ћелија
Да би се ови компактни хромозоми видели под микроскопом, хромозоми морају бити ван бијелих крвних зрнаца. Ово се постиже третирањем бијелих крвних зрнаца посебним решењем које их узрокује. Ово се ради док су ћелије на микроскопском слајду. Останак остатака из бијелих крвних зрнаца се опере, остављајући хромозом заглављен на клизачу.
7. Очигледање хромозома
Хромозоми су природно безбојни. Да би један хромозом рекао од другог, специјална боја названа Гиемса бојена је на слајду. Гиемса боја мрља регионе хромозома који су богати базама аденин (А) и тимин (Т). Када су обојени, хромозоми изгледају као низови са светлосним и тамним опсезима. Сваки хромозом има специфичан образац светлих и тамних опсега који омогућавају цитогенетици да прикаже један хромозом од другог. Сваки мрачни или светлосни опсег обухвата стотине различитих гена.
8. Анализа
Када се хромозоми обојени, слајд се ставља под микроскоп за анализу. Затим се узима слика хромозома. До краја анализе ће се утврдити укупан број хромозома, а хромозоми су распоређени по величини.
9. Бројање хромозома
Први корак анализе је бројање хромозома. Већина људи има 46 хромозома. Људи са Довновим синдромом имају 47 хромозома. Такође је могуће да људи немају хромозоме, више од једног додатног хромозома или део хромозома који је или недостаје или дуплира. Ако посматрамо само број хромозома, могуће је дијагностиковати различите услове, укључујући Довнов синдром.
10. Сортирање хромозома
Након одређивања броја хромозома, цитогенетичар ће почети сортирање хромозома. Да би се сортирали хромозоми, цитогенетичар ће упоредити дужину хромозома, поставити центромере (подручја у којима су спојени двоје хроматида) и локацију и величине Г-опсезима. Паројеви хромозома нумерисани су од највећих (број 1) до најмањих (број 22). Постоји 22 пара хромозома, названих аутосомес, који се тачно подударају. Постоје и сексуални хромозоми, женке имају два Кс хромозома док мужјаци имају Кс и И.
11. Поглед на структуру
Поред прегледа укупног броја хромозома и полних хромозома, цитогенетик ће такође погледати структуру специфичних хромозома како би се уверило да нема недостајућег или додатног материјала, као и структурних абнормалности као што су транслокације. Трансокација се јавља када је део једног хромозома повезан са другим хромозомом. У неким случајевима, две пиће хромозома се замењују (уравнотежена транслокација), а други пут се додају или недостају додатни комадићи из једне хромозома.
12. Коначни резултат
На крају, коначни кариотип приказује укупан број хромозома, пол и све структурне абнормалности са појединачним хромозомима. Дигитална слика хромозома генерише се са свим хромозомима распоређеним по броју.
Границе теста кариотипа
Важно је напоменути да док тестирање кариотипима може дати доста информација о хромозомима, овај тест не може вам рећи да ли постоје специфичне генске мутације, као што су оне које узрокују цистичну фиброзо . Ваш генетски саветник може вам помоћи да разумете шта тестови кариотипа могу рећи и шта не могу. Потребне су даља истраживања да би се проценила могућа улога генских мутација у болестима или спонтаностима.
Такође је важно напоменути да понекад кариотипски тестови можда не могу открити неке хромозомске абнормалности, као што је када је присутан плацентални мозаицизам.
Будућност
У садашњем времену, тестирање кариотипа у пренаталном окружењу је прилично инвазивно, што захтева амниоцентезу или узимање узорака хорионских вила. У току су студије у којима се процењује ДНА без ћелија у узорку мајке у крви као много мање инвазивна алтернатива за пренаталну дијагнозу генетских абнормалности код фетуса.
Боттом Лине на чекању на резултате кариотипа
Док чекате на резултате кариотипа, можда ћете се осећати веома забринуто, а недељу или две за добијање резултата може се осећати као еонс. Узмите то време да се ослоните на своје пријатеље и породицу. Учење о неким условима повезаним са абнормалним хромозомима такође може бити од помоћи. Иако многи услови дијагностикани са кариотипом могу бити разарајући, има много људи који живе са овим условима који имају одличан квалитет живота.
> Извори
- > Кумар, Винаи, Абул К. Аббас и Јон Ц. Астер. Роббинс анд Цотран Патхологиц Басис оф Дисеасе. Пхиладелпхиа: Елсевиер-Саундерс, 2015. Штампа.
- > Нортон, М. и Б. Ринк. Промена индикације за инвазивно тестирање у доби побољшања скрининга. Семинари у перинатологији . 2016. 40 (1): 56-66.
- > Схах, М., Цинниоглу, Ц., Маисенбацхер, М., Цомстоцк, И., Корт, Ј. и Р. Латхи. Упоређивање цитогенетике и молекуларног кариотинга за хромозомске тестове испитиваних супстанци. Плодност и стерилитета . 2017. 107 (4): 1028-1033.