Шта је ПЦР анализа?
Анализа ланца ланца полимеразе (ПЦР) је лабораторијска техника дизајнирана да идентификује мале количине ДНК у узорку процесом познатом као амплификација . Приликом амплификације ПЦР-а, ДНК интереса се више пута копира све док не постоји довољно за анализу и откривање. На пример, ПЦР се може користити за идентификацију малих количина ДНК из организама који узрокују гонореју или кламидију који су присутни у узорку урина .
Како функционише ПЦР?
Први корак у ПЦР-у је загријавање узорка тако да се двострука ДНК раздваја на две појединачне жице - то се назива денатурација . Затим се прајмери , кратки узорци ДНК који се подударају са крајевима секвенце интереса ДНК, комбинују са узорковањем ДНК. После тога, ДНК полимераза се користи за покретање репликације ДНК на локацији прајмера. Коначно, ДНК се загрева да би се раздвојили још једном, а читав ПЦР процес почиње поново.
Количина ДНК сегмента који је присутан у узорку експоненцијално повећава са сваким ПЦР циклусом: једна копија постаје два, затим постаје четврта, тада постаје осам, итд. тако да је генерално потребно само 20 до 40 циклуса да би се утврдило да ли је ДНК у питању присутна (и, ако јесте, да обезбеди довољан узорак за анализу).
Сви кораци полимеразне ланчане реакције - денатурирање ДНК, примена прајмера и издужење ДНК - се дешавају на различитим температурама, тако да се након почетне мешавине састоји, кораци се могу контролисати кроз процес познат као термококинг , у којој се температура одржава на потребним нивоима довољно дуго за сваки корак.
Према томе, ПЦР је ефикасан начин амплификације количине циљане ДНК у једној епрувети са мало потребе за људском интервенцијом.
Полимеразна ланчана реакција представља револуцију у биолошкој технику када је први пут развијена почетком осамдесетих година, а креатор ПЦР-а, Кари Муллис, добитник је Нобелове награде за хемију за свој рад 1993. године.
Зашто је ПЦР релевантан за СТД тестирање?
Полимеразна ланчана реакција и сродне технике попут лигасе ланчане реакције , показују да су све значајније за тестирање СТД. То је зато што ове технике могу директно идентификовати мале количине виралне ДНК или РНК у узорцима. Идентификација генетског кода патогена не захтева да је патоген жив - као бактеријска култура или вирусна култура . Такође не захтева да се инфекција јавља довољно времена пре него што су људи развили детектабилну реакцију антитела (као што је откривена од стране ЕЛИСА ). То значи да ПЦР технике могу некада открити болести раније од других тестова и без колико треба да се брине о одржавању узорака живих или тестирања у тачно правом тренутку.